细胞培育 预防支原体感染 消毒方案

－－  欧菲姆过氧化氢干雾灭菌技术在细胞培养的应用

    诺福（中国）生态　　　　　　　　　　　　　

　　　　技术经理：梁俊　　

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部分：概述

 细胞培养支原体污染了怎么办？细胞被支原体污染会有什么影响？细胞生产缓慢，细胞不贴壁悬浮起来是支原体污染了吗？细胞支原体污染预防措施有哪些管用的方法?细胞培养中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等。说起支原体污染，估计细胞培养的同学就开始犯愁了。细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%。

 支原体污染的来源包括:工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养和器材要保证无菌；在细胞培养中加入适量的抗生素。

 据了解，抗生素不能完全*支原体感染，停药后一段时间可以复发。本文着重讲述细胞支原体污染预防之环境空间消毒方案，从根本入手预防解决细胞培养支原体污染问题，同时也能预防环境中的细菌污染、真菌污染及病毒污染等。环境空间消毒包括：环境空气消毒、物体表面消毒、生物安全柜或超净工作台灭菌及培养箱消毒。

目前大多数细胞培养室只是简单安装了臭氧消毒机，或者用新洁尔灭和酒精消毒。而从建立使用到后期从来没有经过大消毒（熏蒸灭菌），这给细胞培养环境微生物污染带来了极大的隐患和风险，因为臭氧消毒能力有限不稳定而且不能全面覆盖，无法杀灭微生物休眠体，单纯的臭氧消毒已不能深入彻底的解决环境微生物问题，只能说是一种微生物水平控制的辅助手段。这种有效措施传统一般为甲醛熏蒸全面彻底杀灭病原菌微生物，不留卫生死角。但是现在的人们谈甲醛色变。都不愿多接触。根据美国FDA、新版GMP及相关国际组织资料显示：现行的主流无菌室环境空间消毒是过氧化氢灭菌，过氧化氢灭菌应用于细胞培养室消毒代替甲醛熏蒸将成为未来趋势。过氧化氢干雾灭菌技术代替甲醛消灭病原菌（支原体、衣原体、立克次氏体等）已成为近来受到热捧的新空间消毒方式。无毒无害、无残留、灭菌快速及消毒效力强等广泛得到专家学者的认可。

第二部分  欧菲姆干雾空间灭菌技术介绍

  欧菲姆干雾过氧化氢灭菌器为法国原装进口，专门针对洁净厂房无菌室GMP设计，采用了全球进口的雾化技术，雾化粒径平均达到3—5微米，配合**杀孢子剂使用，灭菌效果能对嗜热脂肪杆菌芽孢降低6个对数值。增效了空间扩散均匀性，迅速弥漫充满整个密闭空间不放过每一处死角，其均匀性、无残留及对机器无伤害特征非常吻合细胞房环境消毒及培养箱里面消毒。 

设备原理：

　 电源式干雾灭菌系统是使用电源带动（无须使用压缩空气），利用文丘里原理高速吸入空气，在喷头内给空气足够大的动能。让气体高速与消毒液碰撞产生直径小于5微米的干雾颗粒。让消毒液以干雾颗粒的形式弥散在需要灭菌的

无菌洁净区，从而达到彻底灭菌效果，可替代熏蒸。原理非常简单，但是需要解决：瞬间提供空气足够高的动能让颗粒达到均匀的3－5微米、散热降噪、设备空间占用三大问题。而欧菲姆*的硼钴合金自带润滑功能的器械喷头设计，将干雾设备的功效扩大化的同时，极大的降低了空间占用，解决了散热，降噪的问题。这些技术无论如何都是的。这些特点也是对无菌室消毒灭菌非常适用的。

干雾灭菌方案构成
诺福**杀孢子剂 + 欧菲姆干雾灭菌设备

诺福**杀孢子剂的特点：

1，杀菌效力广谱高效：同时杀灭200多种微生物。30分钟对黑色枯草芽孢、嗜热脂肪芽孢杆菌均能稳定达到6个对单位杀灭率。

2，欧盟进口，无味、无毒，对人体、环境安全。欧盟医疗食品安全认证。

3，验证资料齐全：可提供杀菌效力验证；残留验证；材料兼容性验证三项验证的详细资料，可提供验证模版。易于通过GMP验证。

4，产品在欧洲和北美广泛使用。不影响过欧盟CGMP，美国FDA认证。

欧菲姆干雾灭菌设备的特点

1，*法国原装进口，全球进的雾化技术。干雾微粒均匀达到3－5微米。2，全球*的干雾技术，完全不留死角。

杀菌时间超短，2-3个小时可完成整个灭菌流程

3，体积小、重量轻（净重5.8KG），可方便使用大空间洁净区（多点布置），和小空间无菌室灭菌。

4，电源连接，方便移动，是实验室、无菌室、细菌间、细胞房环境消毒。

欧菲姆过氧化氢灭菌系统参数：

喷雾粒径：平均3μm（粒子径为镭射折射法的测定值）

动能：电源

喷雾速度：80m/s

喷雾量：1000ml/60min

配合杀孢子剂容量：1000ml

功率：1.1千瓦

适用液体：诺福**过氧化氢杀孢子剂（GMP专用）

灭菌体积：50-500立方米 

材质：HDPE

尺寸：50cmx33cmx34cm(长×宽×高)  

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