改良大肠杆菌O157显色培养基使用说明书
此培养基用于大肠杆菌O157的分离和鉴定。
一、组分
琼脂 15.0g/L
蛋白胨、酵母粉 13.0g/L
色素 1.2g/L
添加剂 A 1瓶
添加剂 B 1瓶
pH 7.0±0.2
二、操作
1. 称取瓶内干粉,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可按29.2g/L的比例扩大或缩小。
2. 上述干粉缓慢倒入蒸馏水中,充分搅拌溶解。
3. 加热至100℃,并按常规不断搅拌。如果用高压灭菌锅,不要加压,加热不能超过100℃,混合物也可以在微波炉内加热,使用微波炉加热时,煮沸后立即移出微波炉并不断搅拌,而后移入微波炉再加热,直至完全溶解(大气泡代替泡沫产生,大约需要2分钟)。
4. 冷却至45-50℃,待用。
5. 在添加剂A中加入1ml无菌水和在添加剂B中加入1ml95%乙醇,放置在37℃水浴加热10分钟,轻轻摇动待内容物全部溶解方可使用。然后以无菌手续分别加入到培养基中,轻轻混匀。(添加剂A和B各1ml,可用于1000ml培养基,可按比例放大或缩小,剩余的添加剂可以保存在-20℃冰箱中,有效期半年),然后把混匀的培养基倾入培养皿或试管。
三、贮存
1.添加剂A和B,4℃保存,有效期一年。
2.干粉保存在15-30℃环境下。倾注好的培养基在室温可保存1天,4℃冰箱中可贮存两星期。
四、结果
划线接种(如果培养基刚从冰箱中取出,要恢复至室温后才能使用),37℃培养24小时。
初筛微生物 |
菌落颜色 |
大肠杆菌O157 |
浅红色至淡紫色,中心灰褐色 |
大肠菌群 |
铁蓝色 |
★ 建议通过乳胶试验验证可疑菌落。
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