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ABI7500荧光定量PCR仪系统仪器特点:
●五色荧光同时检测支持各种应用需要,支持染料包括:FAM?/SYBR® Green I,VIC®/JOE?,NED?/TAMRA?/Cy3®,ROX?/Texas-Red®和Cy5®;
●更好的激发光源设计使长波长红色荧光的检测灵敏度大大提高;
●支持标准的96孔板快速反应模式,大大降低实时定量PCR所需要的时间。
ABI7500荧光定量PCR仪软件特点:
●反应板设置指南软件使实验设计非常简单,包括复杂的多色荧光实验;
●可选择快速、标准或者9600反应模式;
●实时监测扩增曲线;
●实验过程中可以增加PCR循环数;
●自动设置荧光基线,自动计算荧光阈值使数据分析大大简化;
系统主要应用:
基于相对定量分析的基因表达分析
以标准曲线为基础的病原体定量分析
定性的PCR扩增后核酸序列的SNP基因型分析
以阳性内对照为基础的阳性/阴性结果判定
仪器性能:
7500型快速实时荧光定量PCR系统经过验证可以达到如下性能指标:
9个数量级的线性范围;
可以检测20 μL反应体积单一报告荧光TaqMan®实验中仅10个起始拷贝数的模板,其可置信度高达99.7%。
Veriti PCR仪可以提供给您Applied Biosystems一如既往的可靠性能,并且具有加强的功能适合您PCR的应用。系统具有四种形式以满足不同热循环的需求:Veriti 96孔(0.2或0.1mL)、384孔、或0.5mL 60孔。彩色触摸屏提供了功能强大而操作简单的用户界面,简化了Veriti PCR仪的设置和使用。此外,Veriti 96孔PCR仪的灵活特性适合快速或标准形式的PCR反应,同时具备VeriFlexTM加热块,可以提供优于温度梯度的PCR优化功能。
主要特点
Veriti 96孔PCR仪可以提供6个温控模块用于PCR优化
适合进行快速和标准形式的PCR反应
如您所愿的可靠性能
非常易于操作
用于聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR),扩增特定的DN段
灵活特性适合快速或标准形式的PCR反应,同时具备VeriFlexTM加热块,可以提供优于温度梯度的PCR优化功能。
6.5吋VGA彩色触摸屏提供了功能强大而操作简单的用户界面,简化了Veriti PCR仪的设置和使用
ABI Veriti PCR仪操作步骤:
1、打开PCR仪的热盖,插入0.2ml的样品管。盖好热盖。
2、打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟。
3、初始化完成后,显示主菜单:
4、点“Browse/New Methods”,进入PCR程序列表:
5、可以直接点一个PCR程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可以选 择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序:
6、添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一段新的程序。
7、修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。
8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。
9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。
10、建立梯度模式:
1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下
2)点“VeriFlex step”,出现梯度创建窗口:
输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。注意:相邻的两个梯度温度之差不能超过5℃!
11、建立渐变模式:
2)点“Auto Delta”,出现渐变模式创建窗口。
点“Staring Cycle”,输入起始循环数;点“Delta Temperature”,输入温度变化值;点“Delta Time”,输入时间变化值。渐变模式适用于touchdown PCR,可以提高PCR反应的特异性。例:输入起始循环数为2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,则表示从第2个循环开始,每循环一次升温0.5℃,时间增加5S.
12、增加暂停步骤:
1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下
2)点“Pause”,出现如下窗口。
输入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。上图表示每隔10个循环暂停10s,在10个循环的第1个循环之前暂停。
13、编辑PCR程序完成后,点“Save”保存。
点“Run Method”,输入PCR程序名称;点 ,选择保存PCR程序的文件夹(如 果要保存在USB文件夹中,需要先插U盘)。再输入反应体积和热盖温度(这两项在运行程序时可以修改)。点“SaveδExit”确定。
14、回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序。
15、点“Start Run”,出现运行参数设置窗口
输入反应体积和热盖温度,点“Start Run Now”开始运行PCR程序。
16、仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口
A- 运行状态栏,显示运行温度和剩余时间
B- 加热警示标记
C- 阶段指示
D- 步骤温度
E- 步骤时间
F- 步骤指示
G- 状态报告,显示日期、时间和仪器状态
H- 延伸箭头,点箭头可以显示更多的步骤
16、暂停运行: 点“Pause Run”,仪器暂停,出现暂停选项栏
“Remaining Time”显示暂停剩余时间,“Elapse Time”显示已暂停时间。
如果需要修改暂停时间,点 ,输入时间值,点“Done”确定;点“Resume Run”, 结束暂停,继续运行PCR程序。
7、终止运行:点“Stop”可以终止整个PCR程序。
18、反应报告:
PCR程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。该报告可以保存和打印。
19、PCR反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。并开盖放置,使热盖和加热模块正常降温。
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